West blot（也称为Western印迹）是一种用于检测特定蛋白质在细胞或组织样本中存在的技术。这项技术结合了凝胶电泳和免疫测定的特点，能够提供关于目标蛋白大小和相对数量的信息。
首先，样品中的蛋白质通过SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳）分离。这个过程根据蛋白质的分子量将它们按照从小到大的顺序排列在一个二维凝胶上。然后，这些分离后的蛋白质被转移到一张固相载体上，通常是硝酸纤维素膜或者PVDF膜。这一步骤被称为转膜，目的是为了让蛋白质均匀地附着在膜表面以便后续分析。
接下来，在封闭步骤中，使用非特异性结合位点封闭剂处理膜以防止抗体与膜表面发生不必要的反应。之后，加入一抗——一种能够特异性识别并结合目标蛋白的抗体。一抗可以选择性地与目标蛋白结合形成复合物。为了便于观察，随后添加二抗，它标记有酶或者其他可检测信号的物质，如荧光染料等。
最后，在适当的条件下孵育后，通过化学发光成像系统或其他成像设备记录下阳性信号的位置和强度。这样就可以确定目标蛋白的存在与否及其大致浓度水平。West blot不仅广泛应用于基础科学研究领域，还在医学诊断及药物开发等方面发挥着重要作用。
